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    使用過敏源試劑前怎么可以不了解這些!

    日期:2022-08-12瀏覽:534次

      過敏源試劑采用親和素-生物素化過敏原抗原預包被板ELISA原理,檢測人血清/血漿中存在的針對特異性過敏原IgE抗體,配以酶標記抗人IgE單克隆抗體作為標記物。加入底物TMB顯色后終止反應,在450nm波長測各孔O.D值,O.D值的大小與待檢抗體含量成正比。
     
      過敏源試劑主要組成成分:
     
      檢測板:包被有過敏原和生物素標記的牛血清白蛋白(陽性質控,位于每條試劑條的較上端)的硝酸纖維素膜,置于塑料反應槽中;
     
      洗脫液:(TRIS/NaCl,包含NaN3),可稀釋的清洗液;標記有生物素的抗人IgE抗體(多抗),含NaN3;酶標鏈霉親和素,連接有堿性磷酸酯酶的鏈霉親和素(含C4H5NOS和C4H6BrNO4);底物,BCIP/NBT(5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸鹽/氯化硝基四氮唑藍)。
     
      過敏源試劑的試驗操作:
     
      試劑盒中的所有成分必須是同一批。過期時請勿使用。使用前須平衡至18~30C.
     
      1.去掉尾端的白色封頭和頂端的紅蓋,讓反應管內的緩沖液排出。用紗布擦試細頭。
     
      2.將注射器接在反應管的頂端,將標本由細頭抽到注射器接頭
     
      3.將反應管平放,在室溫下(18-30C)反應100分鐘。
     
      4.將標本從反應管排出,抽出注射器的推桿,由注射器針簡向反應管內注入1毫升(4項組合產品為0.8m)清洗液,將注射器的推桿插入并推到底,用紗布擦試細頭。
     
      5.將綠色的結合液由細頭抽到注射器的接頭處。
     
      6.將反應管平放,在室溫下(18~30C)反應100分鐘或16小時。
     
      7.將結合液由反應管排出,抽出注射器的推桿。加五濉清洗液到注射器針簡中,讓它流下。再在注射器針簡內注入1毫升(4項組合產晶為0.8m1)清洗液,讓它流過反應管。將注射器的推桿插入并推到底,用紗布擦試細頭。
     
      8.在塑料燒杯中注入少量(約2毫升,4項組合產品為1.5ml)清洗液。通過反應管將清洗液抽到注射器中。抽出注射器的推桿,讓清洗液流出。9.在注射器針簡內注入1毫升(4項組合產F品為0.8m)清洗液,讓它自然流下。重復一次。將注射器的推桿插入并推到底,用紗布擦試細頭。
     
      10.將黃色的底物/指示劑通過反應管抽到注射器中。
     
      11.平放反應管,強陽性標本在5分鐘內可觀察由黃到紫的顏色變化,弱陽性標本在90分鐘內觀察顏色變化。

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